产品描述
猪伪狂犬gE鉴别ELISA诊断试剂盒用于检测猪血清中抗伪狂犬病毒gE蛋白的抗体。用于区别临床野毒感染猪和用gE基因缺失疫苗免疫的猪。
试剂组成:
1.预包被板 1套;6. 样本稀释液(5号液) 1支;
2.酶结合物(1号液) 1支;7. 终止液(6号液) 1支;
3.20倍浓缩洗涤液(2号液) 1支;8. 阳性对照品 1支;
4.底物(3号液) 1支;9. 阴性对照品 1支;
5.显色剂(4号液) 1支;10.使用说明书 1份;
操作程序:
1.洗涤液配制:使用前,浓缩的洗涤液应恢复至室温(25℃左右),并摇动使沉淀的盐溶解(最好在37℃水中加热5-10),然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释,稀释好的洗涤液在4℃可以存放7天。
2.样本稀释:用样本稀释液(5号液)将待检血清按1:40稀释,如取5ul血清与195ul样本稀释液,充分混匀;注意:阳性对照和阴性对照也按1:40稀释。
3.加样反应:取出所需反应板条,将稀释好的待检血清取100μl加入到检测板孔中。阴性对照和阳性对照各设2孔,每孔100μl。轻轻振匀孔中样品(勿溢出),置37℃温育30分钟。甩掉板孔中的溶液,用洗涤液洗板5次,200μl/孔,每次静置3分钟倒掉,再在干净吸水纸上拍干。
4.加酶反应:每孔加酶结合物(1号液)2滴(100μl),置37℃温育30分钟。洗涤5次, 方法同3。切记每次在干净吸水纸上拍干。
5.显色反应:每孔先加底物(3号液)一滴(50µl)、再加显色剂(4号液)一滴(50µl),混匀,室温(18℃-25℃)避光显色10分钟。每孔加终止液(6号液) 1滴(50μl),10分钟内测定结果(检测前在震荡器上轻轻震动一下)。
结果判断:
在酶标仪上测各孔OD630值,试验成立的条件是阳性对照孔OD630值应≥0.8,阴性对照孔OD630值平均值必须低于0.3。 样品孔OD630值大于0.33,判为阳性;样品孔OD630值小于0.30,判为阴性, 样品OD630值在0.30到0.33之间,判为可疑。
注意事项:
1.试剂盒在2-8℃下保存,每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧,各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。
2.待检血清样品数量较多时,应先使用血清稀释板稀释完所有要检测血清,再将稀释好的血清转移到检测板, 使反应时间一致。
3.浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释,如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。
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